二氧化碳培養(yǎng)箱是現(xiàn)代大中型醫(yī)院進行科學(xué)研究*的重要設(shè)備,分布于醫(yī)院各個實驗室。常用的二氧化碳培養(yǎng)箱有兩種類型:氣套式和水套式。二氧化碳培養(yǎng)箱有兩條基本的要求:一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提供zui穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。
二氧化碳培養(yǎng)箱使用5大要點:
1.一定要做好使用前的準備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負責(zé)使用,操作盤上的任何開關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動,以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度,濕度的波動,同時降低機器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5 cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動不超過220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液*擦洗,防止其他微生物污染,導(dǎo)致實驗失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過濾裝置。
2.正確充氣延長二氧化碳傳感器使用壽命
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低時,二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當(dāng)進氣壓達0.1 MPa時,自動停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),使進氣壓力增大,當(dāng)超過0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會損傷二氧化碳傳感器。開始這種損傷效應(yīng)不明顯,不易察覺,反復(fù)錯誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積zui終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳進氣壓大小有關(guān),只要做好進氣壓調(diào)節(jié),就能保護二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價格昂貴,更換不易,所以一定要做好進氣壓調(diào)節(jié),延長二氧化碳傳感器使用壽命。
3.做培養(yǎng)時注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因為飽和濕度環(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細胞生長,足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開關(guān)門后)才能保證不會由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過程中,在箱內(nèi)托盤中放一定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補加水,使培養(yǎng)細胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳氣體易揮發(fā),液體pH值升高,影響細胞生長,在工作中要力求避免此問題發(fā)生。樣本多時,箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開門時間,減少箱內(nèi)氣體和濕度變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細胞生長環(huán)境。
4.防止二氧化碳培養(yǎng)箱污染做好箱內(nèi)消毒二氧化碳培養(yǎng)箱污染是導(dǎo)致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,所以要減少和防止污染的發(fā)生,主要途徑是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,采取消毒措施。為了培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些二氧化碳培養(yǎng)箱設(shè)計了自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。
5.二氧化碳培養(yǎng)箱零點飄移的監(jiān)控和零點的調(diào)整培養(yǎng)箱使用過程中,二氧化碳零點會發(fā)生自然飄移現(xiàn)象,這種現(xiàn)象不能在箱面氣體顯示框中表現(xiàn)出來,使用者也不易覺察到飄移結(jié)果。二氧化碳零點是否飄移,可通過二氧化碳氣體測試儀,從控制盤上的采樣口可以采到培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體,然后用氣體色譜儀就可以測到二氧化碳濃度了。